一、体内受精和早期胚胎发育
1．精子和卵子的发生[判断正误]
(1)精子和卵子的发生都是从初情期开始的。(×)
(2)卵子形成过程中，MⅠ和MⅡ是不连续的。(√)
(3)判断卵子是否受精的标志是在卵黄膜和透明带的间隙观察到两个极体。(√)
2．受精
准备阶段
受精阶段
3．早期胚胎发育
↓
↓
↓
二、体外受精和早期胚胎培养[判断正误]
(1)哺乳动物的体外受精主要包括卵母细胞的采集、精子的获取和受精等步骤。(√)
(2)收集精子的方法有假阴道法、手握法和电刺激法等。(√)
(3)采集的卵母细胞可直接与精子受精。(×)
(4)精子体外获能方法有培养法和化学诱导法两种。(√)
(5)培养哺乳动物胚胎的培养液，其成分较简单，一般只需一些无机盐和有机盐类即可。(×)
三、胚胎移植
1．胚胎移植的生理学基础
胚胎移入的基础
哺乳动物发情排卵后，同种动物的供、受体生殖器官的生理变化是相同的
胚胎收集的基础
哺乳动物的早期胚胎形成后，在一定时间内不会与母体子宫建立组织上的联系，而是处于游离状态
移入胚胎存活的基础
受体对移入子宫的外来胚胎基本上不发生免疫排斥反应
保留遗传特性的基础
供体胚胎可与受体子宫建立正常的生理和组织联系，但供体胚胎的遗传特性在孕育过程中不受影响
2．胚胎移植的基本程序
3．胚胎分割[判断正误]
(1)胚胎分割可看作是无性繁殖。(√)
(2)进行胚胎分割时，应选取发育良好的囊胚或原肠胚。(×)
(3)在对囊胚进行分割时，要将滋养层细胞均等分割。(×)
4．胚胎干细胞
(1)早期胚胎或原始性腺中分离。
(2)特点
[知识体系构建]
受精作用、体外受精及早期胚胎的发育和培养
(1)(2012·浙江卷T2A)绝大多数精卵细胞的识别具有物种特异性。(√)
(2)(2011·山东卷T35(1))卵母细胞除从活体输卵管中采集外，还可以从处死的雌鼠卵巢中获取。(√)
(3)(2011·江苏卷T18A)体外受精是指获能的精子和成熟的卵子在相应溶液中受精。(√)
(4)(2012·浙江卷T2B,2009·江苏卷T8A)卵裂期胚胎中细胞数目和有机物总量在不断增加，细胞的体积随分裂次数增加而不断增大。(×)
(5)(2011·江苏卷T18C)早期胚胎培养与动物细胞培养的培养液通常都需加入血清。(√)
(6)(2012·浙江卷T2D)原肠胚发育分化形成内外两个胚层。(×)
1．精子、卵子发生的比较
项目
精子发生
卵子发生
区别
场所
睾丸的曲细精管
卵巢(MⅠ)、
输卵管(MⅡ)
开始时间
初情期后
胚胎性别分化后
过程特点
①MⅠ、MⅡ是连续的
②需要变形
③两次细胞质分裂均等
①MⅠ、MⅡ是不连续的
②不需要变形
③两次细胞质分裂不均等
结果
形成4个精细胞
形成1个卵细胞
相同点
①原始生殖细胞的增殖方式为有丝分裂；
②生殖细胞的成熟经减数分裂完成；
③成熟过程均经一次复制和两次分裂，子细胞染色体数目减半
2．受精作用
(1)受精作用的场所：输卵管。
(2)受精前的准备阶段：
①精子获能：精子必须在雌性动物的生殖道发生相应的生理变化后，才获得受精能力的生理现象。
②卵子的准备：在输卵管中发育到减数第二次分裂的中期，才具有与精子受精的能力。
(3)受精阶段——四步曲：
第一步：精子穿越放射冠和透明带。顶体反应使顶体内的酶释放出来并溶解放射冠内卵丘细胞之间的物质，透明带反应是防止多精入卵受精的第一道屏障。
第二步：精子进入卵黄膜。卵黄膜封闭作用是防止多精入卵受精的第二道屏障。
第三步：原核形成。雄原核形成和雌原核形成。
第四步：合子形成。雌雄原核融合形成合子(受精卵)。
3．卵细胞只允许同种单个精子完成受精的保障
(1) 同种生物精卵结合的保障：
卵细胞透明带上存在精子的特异识别受体，只允许同种生物的精子与卵细胞结合。
(2) 防止多精入卵的保障：
①单个精子穿过透明带，触及卵黄膜的瞬间引发透明带反应，透明带蛋白质变性成为较坚韧的一层，阻止其他精子进入，这是防止多精入卵的第一道屏障。
②单个精子穿过卵黄膜入卵后，立即引发卵黄膜的封闭作用，拒绝其他精子再进入卵细胞，这是防止多精入卵的第二道屏障。
(3) 受精的标志和受精完成的标志：
①受精标志：在透明带和卵黄膜之间观察到两个极体。
②受精完成的标志：雌、雄原核的融合。
4．早期胚胎发育
(1)过程：受精卵→卵裂期→桑椹胚→囊胚→原肠胚
(2)图示：
5．体外受精与胚胎的早期培养
(1)体外受精的原理：人工模拟体内环境(包括营养、温度、pH等)，使初级卵母细胞成熟和精子获能，最终完成受精和胚胎保存。
(2)体外受精主要操作步骤：
①卵母细胞的采集：
方法一：对小型动物一般采用促性腺激素处理，排卵后直接从输卵管中冲取卵子，直接与获能的精子在体外受精。
方法二：对大型动物一般采用从活体的卵巢中吸取卵母细胞，经体外人工培养成熟后与获能的精子在体外受精。
②精子的采集和获能：
采集方法：假阴道法、手握法和电刺激法等。
获能方法：培养法和化学诱导法。
③受精：获能精子和成熟卵子在共同培养一段时间后便可受精。
(3)胚胎的早期培养：
①培养的目的：检测受精状况和受精卵的发育能力。
②培养液的成分：水、无机盐、有机盐、维生素、激素、氨基酸、核苷酸以及动物血清等。
③胚胎去向：冷冻保存、移植到受体动物子宫内培养。
高考地位
本考点的高考命题侧重于基础知识的考查，近几年高考赋分有所提升，形式既有选择题又有非选择题
命题角度
(1)结合试管动物的培育过程，考查于体外受精的条件，如典例1；
(2)以图解的形式考查早期胚胎的培养条件及各时期特点，如典例2。
[典例1] (2011·浙江高考)培育“试管山羊”的基本过程如下图所示．若要培育成功，下列叙述正确的是( )
A．甲过程中可通过给母山羊注射有关激素使其超数排卵
B．乙过程的目的之一是促进卵母细胞和精子的成熟
C．丙过程与乙过程中应采用相同成分的培养液
D．丁过程中早期胚胎须移植到供体性状相同的代孕母羊子宫内
[解析] 选A 本题考查动物胚胎工程的应用，意在考查考生对该知识的理解能力。甲过程的目的是采集卵母细胞并培养成熟，可通过注射促性腺激素促进母山羊超数排卵。乙过程的目的是促进精子和卵细胞结合，完成受精作用。受精是在获能溶液或专门的受精溶液中进行，而早期胚胎培养是在发育培养液中进行；丁过程是胚胎移植，是将早期胚胎移植到同种的、生理状态相同的雌性动物子宫内使之继续发育。
[典例2] 下图表示哺乳动物胚胎发育过程的几个阶段，请据图回答问题：
(1)写出各个阶段的名称：
A：________，B：________，C：________。
(2)写出图中各标号的名称：
[2]________，[4]________，[5]________，[7]______，[8]________。
(3)A时期的细胞具有发育上的________性，B时期开始出现________，C时期开始出现________。
(4)[2]将来发育成________。
(5)动物胚胎是由合子经有丝分裂形成的，合子由一个精子和卵子结合的生理基础是________、________。
[解析] 本题考查受精和动物的胚胎发育等知识以及识图、填图能力。(1)图中A是桑椹胚，B是囊胚，C是原肠胚。(2)图B中1是滋养层细胞，2是内细胞团，3是透明带，4是囊胚腔；图C中5是外胚层，6是滋养层，7是原肠腔，8是内胚层。(3)桑椹胚细胞具全能性；囊胚开始出现细胞分化，分化为滋养层细胞和内细胞团细胞；原肠胚已有胚层分化，分化为外胚层、内胚层。(4)内细胞团细胞将发育为胎儿的各种组织，滋养层细胞将发育为胎膜和胎盘。(5)受精时的透明带反应和卵黄膜封闭作用是防止多精入卵的两道屏障。
[答案] (1)桑椹胚 囊胚 原肠胚
(2)内细胞团 囊胚腔 外胚层 原肠腔 内胚层
(3)全能 细胞分化 胚层分化
(4)胎儿的各种组织
(5)透明带反应 卵黄膜封闭作用
胚胎移植及胚胎分割技术
(1)(2011·江苏卷T18B)受精卵发育到原肠胚阶段才能进行胚胎移植。(×)
(2)(2012·江苏卷T9A)通过胚胎移植技术，可以实现良种牛的快速繁殖时，受精和胚胎的早期培养都需要在体外进行。(×)
(3)(2009·江苏卷T8B)胚胎分割时需将原肠胚的内细胞团均等分割。(×)
(4)(2010·江苏卷T16C)利用胚胎分割技术可以获得两个基因型完全相同的胚胎。(√)
(5)(2012·江苏卷T9D)胚胎分割移植实现同卵多胎的成功率较低。(√)
1．胚胎移植及胚胎分割移植
(1)概念：
是指将雌性动物体内的早期胚胎，或者通过体外受精及其他方式得到的胚胎，移植到同种的、生理状态相同的其他雌性动物的体内，使之继续发育为新个体的技术。
(2)胚胎移植的实质：
胚胎移植实质上是早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移，而胚胎本身的遗传物质并不发生改变，因此各种性状能保持其原来的优良特性。
(3)胚胎移植成功的保障(生理学基础)：
①供、受体生殖器官的生理变化是相同的；
②哺乳动物的早期胚胎形成后，在一定时间内不会与母体子宫建立组织上的联系，而是处于游离状态，这就为胚胎的收集提供了可能；
③受体对移入子宫的外来胚胎基本上不发生免疫排斥反应，这为胚胎在受体内的存活提供了可能；
④供体胚胎可与受体子宫建立正常的生理和组织联系，但移入受体的供体胚胎的遗传特性，在孕育过程中不受任何影响。
[关键一点]
(1)胚胎移植的供体和受体必须是同种生物，同一物种的动物才有可能具有相同的生理特征。
(2)作为受体的雌性动物应为常见或存量大的品种，供体则为优良的品种。
(3)胚胎移植的意义：大大缩短了供体本身的繁殖周期，充分发挥雌性优良个体的繁殖潜力。
(4)胚胎分割：
①材料选择：发育良好、形态正常的桑椹胚或囊胚。
②囊胚期分割要求：内细胞团均等分割，以免影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。
③意义：加快繁殖速度，是动物无性繁殖或克隆的方法之一，其他克隆方法还有核移植。
2．胚胎工程的三个操作流程
(1)试管动物生产流程：
(2)克隆动物的培育流程：
(3)胚胎移植的培育流程(以牛胚胎移植为例)：
↓
↓
↓
↓
↓
↓
↓
[关键一点]
(1)选择的对象包括良种公牛、母牛和普通母牛，处理是指对良种母牛和普通母牛做同期发情处理，以使其生殖器官的生理变化相同；同时要对良种母牛做超数排卵处理，以促其多产生卵子。
(2)冲卵是指将早期胚胎从良种母牛子宫内冲洗出来，而不是冲洗出卵子。
(3)良种牛后代的遗传特性是由供体公牛和母牛决定的，受体母牛只是提供了胚胎发育的场所，不影响后代的遗传特性。
(4)胚胎移植培育流程中有两次使用激素，第一次是使用孕激素对供、受体进行同期发情处理；第二次是使用促性腺激素用于供体的超数排卵。
高考地位
高考对胚胎移植的考查呈逐年升温的趋势，在考查形式上选择题和非选择题都有呈现，复习时应引起足够重视
命题角度
结合流程图，考查胚胎工程相关知识的综合分析，如典例3。
[典例3] 下图为牛胚胎移植的基本程序，请据图回答：
(1)图中a、b、c过程分别是指____________________、__________、________。
(2)在胚胎移植过程中，供、受体母牛选择好后，要用激素进行同期发情处理，这样处理的原因是______________________________，以保证移植的胚胎能够继续正常发育。
(3)从哺乳动物早期胚胎或原始性腺中分离出来的细胞，称为ES或EK细胞，这类细胞的形态特征为__________________________________。
[解析] (1)图中a、b、c依次指超数排卵、胚胎收集、胚胎移植。(2)同期发情处理的目的在于使供受体动物处于相同生理状态，以免发生免疫排斥反应。(3)胚胎干细胞具有体积小、细胞核大、核仁明显的特点。
[答案] (1)超数排卵 胚胎收集 胚胎移植
(2)使供、受体的生理状态相同
(3)体积小、细胞核大、核仁明显
胚胎干细胞
(1)(2009·江苏卷T8C)胚胎干细胞具有细胞核大、核仁小和蛋白质合成旺盛等特点。(×)
(2)(2012·天津卷T1AD)造血干细胞具有分化出多种血细胞的能力，可用于治疗白血病，自体干细胞移植通常不会引起免疫排斥反应。(√)
(3)(2012·浙江卷T2C)囊胚的滋养层细胞具有发育全能性。(×)
(4)(2012·天津卷T1B) 胚胎干细胞在体外培养能增殖但不能被诱导分化。(×)
1．干细胞的类型
类别
来源或举例
特点
全能干细胞
桑椹胚或囊胚及以前
能发育成完整个体
多能干细胞(胚胎干细胞)
内细胞团细胞、原始性腺细胞分离
能分化出动物体内的任何组织
专能干细胞(成体干细胞)
骨髓干细胞、皮肤生发层细胞
能分化出特定的组织
[关键一点] 胚胎干细胞是从早期胚胎或原始性腺中分离出来的一类细胞，包括人类囊胚的内细胞团，具有胚胎细胞的特性。它能长期维持未分化状态，又有全能分化的潜能，在体外培养时仍能维持正常和稳定的染色体组型，在特定的环境诱导下，能分化成各类细胞。因此，它是细胞的源头，是全能细胞，并能够制造机体需要的全部细胞。
2．胚胎干细胞(ES细胞)的应用前景
ES细胞的分离和培养成功是胚胎工程中的重大成就之一，在基础生物学、畜牧学和医学上都具有十分重要的应用价值。
(1)ES细胞可用于治疗人类的某些顽症：利用ES细胞可以被诱导分化形成新的组织细胞的特性，移植ES细胞可以使坏死或退化的部位得以修复并恢复正常功能。
(2)培育成组织器官，用于器官移植。
(3)对ES细胞的培养和诱导，为揭示细胞分化和细胞凋亡的机理提供了有效手段。
(4)ES细胞可用于对哺乳动物个体发生和发育规律的研究。
高考地位
本考点在近几年高考中考查频率不高，考查时多以选择题的形式呈现
命题角度
本考点多以选择题的形式与其他知识结合在一起考查，如典例4。
[典例4] 下图表示利用胚胎干细胞(ES细胞)所做的一系列研究，过程Ⅰ是将带有遗传标记的ES细胞注入早期胚胎的囊胚腔，通过组织化学染色，用于研究动物体器官形成的时间、发育过程以及影响的因素。过程Ⅱ是将目的基因导入胚胎干细胞的过程。下列有关叙述不正确的是( )
A．过程Ⅰ的研究利用了胚胎干细胞具有全能性的特点
B．过程Ⅰ中，囊胚的后一个阶段形成了内、中、外三个胚层及两个囊胚腔
C．过程Ⅱ中可用显微注射法将目的基因导入胚胎干细胞
D．过程Ⅱ中需要用到的工具有限制酶、DNA连接酶和运载体
[解析] 选B 过程Ⅰ利用了细胞的全能性。囊胚的后一个阶段是原肠胚，具有内、中、外三个胚层和原肠腔、囊胚腔两个囊腔。过程Ⅱ中，将目的基因导入动物受体细胞常用的方法是显微注射法，基因工程中常用的工具有限制酶、DNA连接酶及运载体。
[高考随堂体验]
1．(2010·广东高考)骨髓移植是治疗白血病常用的有效方法之一，最主要的原因是移植骨髓中的造血干细胞可在患者体内( )
A．正常生长 B．增殖并分化成多种细胞
C．分泌抗体 D．杀死各种病原菌
解析：选B 移植骨髓中的造血干细胞具有分裂和分化的能力，能分化为血液中的红细胞、白细胞和血小板等正常细胞，血液中产生了正常的白细胞，可以达到治疗白血病的目的。
2．(2010·江苏高考)老年痴呆症患者的脑血管中有一种特殊的β-淀粉样蛋白体，它的逐渐积累可能导致神经元损伤和免疫功能下降，某些基因的突变会导致β-淀粉样蛋白体的产生和积累。下列技术不能用于老年痴呆症治疗的是( )
A．胚胎移植技术 B．胚胎干细胞技术
C单克隆抗体技术 D．基因治疗技术
解析：选A 胚胎移植是将胚胎移植到同种的、生理状态相同的其他雌性动物的体内，使之继续发育为新个体的技术，因此不能用于老年痴呆症的治疗。利用胚胎干细胞可以被诱导分化形成新的组织细胞的特性，移植胚胎干细胞可使坏死或退化的部位得以修复并恢复正常功能，所以胚胎干细胞技术能用于老年痴呆症的治疗。根据题意，只要干扰β-淀粉样蛋白体的存在就可以治疗老年痴呆症，利用单克隆抗体技术生产特定抗体，使之与β-淀粉样蛋白体结合形成沉淀，从而达到治疗老年痴呆症的目的。β-淀粉样蛋白体的产生是由于某些基因的突变造成的，因此通过基因治疗技术把正常基因导入病人体内，使该正常基因的表达产物发挥功能，从而达到治疗老年痴呆症的目的。
3．(2009·宁夏高考)下图为哺乳动物的胚胎干细胞及其分化的示意图。
请回答下面的问题：
(1)胚胎干细胞是从动物胚胎发育至________期的内细胞团或胎儿的________中分离得到的一类细胞。
(2)图中分化程度最低的干细胞是________。在体外培养条件下，培养液中加入________因子，可诱导该种干细胞向不同类型的组织细胞分化。
(3)在机体内，皮肤干细胞分化成皮肤细胞是机体细胞中基因________的结果。
(4)某患者不能产生正常的白细胞，通过骨髓移植可以达到治疗的目的。骨髓移植的实质是将上图中的________细胞移植到患者体内。
(5)若要克隆某种哺乳动物，从理论上分析，上述红细胞、白细胞、神经细胞中不能选用作为供体的细胞是成熟的________，其原因是________。
(6)若某药物可抑制肝肿瘤细胞DNA分子的复制，使用该药物可使肝肿瘤细胞停留在细胞周期的________期。
(7)在制备单克隆抗体过程中的细胞融合阶段，用______细胞与骨髓瘤细胞融合，经多次筛选最终得到能分泌______________的杂交瘤细胞。
解析：(1)胚胎干细胞是从早期胚胎或原始性腺中分离出来的一类细胞，囊胚阶段细胞开始分化为内细胞团和滋养层细胞。
(2)图中分化程度最低的干细胞是胚胎干细胞，全能性最高，在体外培养条件下，该种干细胞可诱导分化形成不同类型的组织细胞，培养液中加入分化诱导因子。
(3)细胞分化是细胞中基因选择性表达的结果。
(4)骨髓是人体的造血组织，存在造血干细胞，骨髓的治疗的实质是将上图的造血干细胞移植到患者体内。
(5)克隆某种哺乳动物需要供体提供细胞核，而成熟的红细胞没有细胞核，所以不能作为供体。
(6)细胞周期包括分裂间期和分裂期，分裂间期完成DNA分子的复制和有关蛋白质的合成。
(7)单克隆抗体过程中的细胞融合阶段，用B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合、筛选最终得到能分泌一种特异性抗体的杂交瘤细胞。
答案：(1)囊胚 原始性腺
(2)胚胎干细胞 分化诱导
(3)选择性表达
(4)造血干
(5)红细胞 细胞中无细胞核
(6)间
(7)B淋巴 特异性抗体
4．(2012·山东高考)毛角蛋白Ⅱ型中间丝(KIFⅡ)基因与绒山羊的羊绒质量密切相关。获得转KIFⅡ基因的高绒质绒山羊的简单流程如下图：
(1)过程①中最常用的运载工具是________，所需要的酶是限制酶和________。
(2)在过程②中，用________处理将皮肤组织块分散成单个成纤维细胞。在培养过程中，将成纤维细胞置于5% CO2的气体环境中，CO2的作用是________。
(3)在过程③中，用________处理以获取更多的卵(母)细胞。成熟卵(母)细胞在核移植前需要进行________处理。
(4)从重组细胞到早期胚胎过程中所用的胚胎工程技术是________。在胚胎移植前，通过________技术可获得较多胚胎。
解析：(1)图中①为重组载体的构建过程，最常用的运载工具为质粒，所需要的工具酶是限制酶和DNA连接酶。(2)图中②为动物细胞培养过程，用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理皮肤组织块可将其分散成单个成纤维细胞；在培养过程中，将成纤维细胞置于5%CO2的气体环境中，CO2的作用是维持培养液的pH。(3)过程③常采用促性腺激素处理，以获取更多的卵(母)细胞；成熟卵(母)细胞在核移植前需要进行去核处理。(4)从重组细胞到早期胚胎过程中所运用的胚胎工程技术是早期胚胎培养，为获得更多的胚胎可采用胚胎分割技术。
答案：(1)质粒 DNA连接酶
(2)胰蛋白酶(或胶原蛋白酶) 维持培养基(液)的pH
(3)促性腺激素(或促滤泡素，孕马血清) 去核
(4)(早期)胚胎培养 胚胎分割
5．(2010·山东高考)胚胎工程是一项综合性的动物繁育技术，可在畜牧业和制药业等领域发挥重要作用。下图是通过胚胎工程培育试管牛的过程。
(1)从良种母牛采集的卵母细胞，都需要进行体外培养，其目的是________________________；从良种公牛采集的精子需________后才能进行受精作用。
(2)在体外培养受精卵时，除了给予一定量的O2以维持细胞呼吸外，还需要提供________气体以维持________。
(3)图中过程A称为________，它在胚胎工程中的意义在于________________________________。
(4)研制能够产生人类白细胞介素的牛乳腺生物反应器，需将目的基因导入牛受精卵，最常用的导入方法是________；获得转基因母牛后，如果______________________即说明目的基因已经表达。
解析：(1)在体外受精前，要对精子进行获能处理，要对卵母细胞进行培养，让其进一步成熟，才具有与精子进行受精的能力。(2)在体外培养受精卵时，需要提供一定量的CO2，以维持培养液的pH。(3)将早期胚胎植入受孕母体的子宫中，属于胚胎移植，它在胚胎工程中的意义有：①可充分发挥雌性优良个体的繁殖潜力；②大量节省购买种畜的费用；③一胎多产。(4)将目的基因导入受精卵的常用方法为显微注射法；如果母牛的乳汁中含有人类白细胞介素，则说明目的基因在母牛体内已经表达。
答案：(1)使卵母细胞成熟(或：使卵母细胞获得受精能力) 获能 (2)CO2 培养液(基)的pH (3)胚胎移植
提高优良母畜的繁殖率 (4)显微注射法 牛奶中含有人类白细胞介素(或牛乳腺细胞已合成人类白细胞介素)
6．(2010·海南高考)请回答胚胎工程和基因工程方面的问题：
(1)应用胚胎工程技术可以培育出“试管牛”。试管牛的培育需经过体外受精、________、________以及在母体中发育和产出等过程。
(2)在“试管牛”的培育过程中，要使精子和卵母细胞在体外成功结合，需要对精子进行处理，使其____________。另外，培养的卵母细胞需要发育至减数第二次分裂的中期，该时期在显微镜下可观察到次级卵母细胞和____________。
(3)通常奶牛每次排出一枚卵母细胞，采用激素处理可使其一次排出多枚卵母细胞，常使用的激素是________________________。
(4)利用基因工程可以获得转基因牛，从而改良奶牛的某些性状。基因工程的四个基本操作步骤是__________、基因表达载体的构建、________________和________________。若要使获得的转基因牛分泌的乳汁中含有人干扰素，则所构建的基因表达载体必须包括：某种牛乳腺分泌蛋白基因及其启动子、________、________、________和复制原点等。将该基因表达载体导入受体细胞所采用的方法是________________(显微注射法、农杆菌转化法)，为获得能大量产生人干扰素的转基因牛，该基因表达载体应导入的受体细胞是__________(受精卵、乳腺细胞)。
解析：(1)“试管牛”是通过在试管中进行体外受精，然后将受精卵进行胚胎培养，将获得的胚胎再利用胚胎移植技术植入母体内，在母体内发育和产出牛个体的过程。(2)为使精卵成功结合需要对精子进行获能处理；处于卵母细胞减数第二次分裂的中期的细胞为次级卵母细胞或第一极体。(3)促性腺激素能够作用于卵巢细胞使其产生更多的性激素从而促进卵母细胞的生成。(4)基因工程的操作步骤为：获取目的基因、构建基因表达载体、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定。构建的基因表达载体首先必须含有牛乳腺分泌蛋白基因以及人干扰素基因这一目的基因，同时为使基因能够正常有序的表达还需要启动子、终止子和复制原点，为了进一步检测目的基因是否成功导入还需要标记基因，因此构建的基因表达载体必须包括：某种牛乳腺分泌蛋白基因、人的干扰素基因、启动子、终止子、标记基因、复制原点；农杆菌转化法是将目的基因导入植物细胞的一种方法，目的基因导入动物细胞通常需采用显微注射法； 如果将该基因表达载体导入受精卵中，受精卵能够分裂分化获得产人干扰素的转基因牛。
答案：(1)早期胚胎培养 胚胎移植
(2)获能 第一极体
(3)促性腺激素(其他合理答案也可)
(4)获取目的基因 将目的基因导入受体细胞 目的基因的检测与鉴定 人干扰素基因(或目的基因) 终止子 标记基因 显微注射法 受精卵
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