幻灯片 1小专题五  微生物的生长与发酵工程简介 ---- 幻灯片 2核心考点整合 ---- 幻灯片 3考点整合一:微生物的生长 1.生长曲线的形成条件 (1)菌种:数量上是少量,但不能是一个,若加大接种量能缩短调整期;种类上是一种,可避免不同种细菌之间的竞争。 ---- 幻灯片 4 (2)培养基:恒定容积的液体培养基。恒定容积提供一定的生存环境,但营养和空间是有限的;液体培养基便于测定群体生长,如通过样品推测细菌总数。 (3)培养条件:适宜条件。 (4)菌体数量的测定方法:定期取样。①测细菌的细胞数目:将等量的待测样品与已知含量的红细胞混匀,固定染色,求出细菌与红细胞的比例,计算出单位体积内的细菌数目;②分离出单位体积培养液中的细菌,称重,计算出其中的细胞总重量。 ---- 幻灯片 52.解读生长曲线 (1)生长曲线如图: ---- 幻灯片 6 (2)生长曲线四个时期主要内容的比较: ---- 幻灯片 7---- 幻灯片 83.研究微生物生长曲线的实践意义 (1)在工业发酵和科研中通常采取一定的措施缩短调整期: ①通过遗传学方法改变微生物的遗传特性使之缩短; ②利用对数期的细胞作为“种子”; ③尽量使接种前后所使用的培养基组成不要相差太大; ④以适当扩大接种量等方式缩短调整期。 ---- 幻灯片 9 (2)发酵中延长稳定期、提高代谢产物产量的方法——连续培养: ①基本原则:微生物培养过程中不断地补充营养物质和以同样的速率移出培养物。 ②优点:缩短发酵周期,提高设备利用率;便于自动控制;产品质量较稳定。 ③缺点:杂菌污染和菌种退化。 ---- 幻灯片 104.影响微生物生长的环境因素 ---- 幻灯片 11---- 幻灯片 12特别提醒: 1.微生物生长速率曲线 ---- 幻灯片 132.细菌的生长曲线与种群的增长曲线比较 (1)细菌的生长曲线与种群的增长曲线均以时间为横坐标,但生长曲线纵坐标是细菌数目的对数,增长曲线纵坐标是种群数量。生长曲线可分为四个时期。 ---- 幻灯片 14 (2)生长曲线的“调整期→对数期”与种群数量变化的“J”型曲线相似:“调整期→对数期→稳定期”与种群数量变化的“S”型曲线相似。 (3)生长曲线中,种内斗争最激烈的阶段是隐定期;与无机环境斗争最激烈的阶段是衰亡期;调整期和对数期种内斗争很小;产生初级代谢产物的最佳时期是调整期;产生次级代谢产物的最佳时期是稳定期。 ---- 幻灯片 15【典例1】 用某种培养基培养谷氨酸棒状杆菌,测得其生长曲线如图甲所示。谷氨酸是谷氨酸棒状杆菌的代谢产物之一,其合成途径如图乙所示。下列有关叙述,不正确的是(  ) ---- 幻灯片 16A.该培养基是恒定容积的液体培养基,含有五大类营养要素物质 B.谷氨酸脱氢酶是组成酶,谷氨酸在图甲中的各个时期都有合成 C.在图甲中的②时期,谷氨酸棒状杆菌代谢旺盛,种内斗争最激烈 D.在图乙中,谷氨酸脱氢酶被抑制的直接原因是其结构发生改变 ---- 幻灯片 17 [解析] 从生长曲线看,是微生物群体在恒定容积的条件下的生长情况;组成酶在各个时期都可以产生,诱导酶是在一定外界条件下产生的;在稳定期种内斗争最激烈;谷氨酸脱氢酶被抑制的直接原因是其结构发生改变,催化效率降低。 [答案] C ---- 幻灯片 18【互动探究1】 (·上海卷)在光照下,将等细胞数量的衣藻和大肠杆菌分别接种到只含无机盐的培养液中培养,结果是(虚线和实线分别表示大肠杆菌和衣藻的生长曲线)(  ) ---- 幻灯片 19 [解析] 本题考查自养型生物和异养型生物的生长曲线。在没有有机物供应的情况下,明确大肠杆菌的生长状况是解答本题的突破口。大肠杆菌是异养型生物,不能利用无机物制造有机物,只能摄取现成的有机物进行生长繁殖,因此在只含无机盐的培养基上几乎不能生长繁殖,而四个图中只有C符合该结论。衣藻是含有叶绿体的低等植物,能进行光合作用合成有机物,因此能生长繁殖,其生长曲线应近似于“S”型曲线。 [答案] C ---- 幻灯片 20考点整合二:发酵工程 一、发酵工程生产产品的流程简图 ---- 幻灯片 21归纳总结: 1.菌种选育的常用方法比较 ---- 幻灯片 222.发酵工程与其他生物工程的比较 ---- 幻灯片 23二、发酵的影响因素及控制 1.温度 (1)造成的影响:①温度影响酶活性,进而影响代谢速率;②影响生物合成的途径,如金色链霉菌在30°C以下时合成金霉素能力较强,在35°C以上时则只合成四环素;③影响发酵液的物理性质以及菌种对营养物质的分解和吸收。 ---- 幻灯片 24 (2)采取的措施:①要根据生产实际合理控制温度,如最适生长温度不一定是该菌体内生成代谢产物的最适温度。②发酵罐中热量来源于有机物的氧化分解、机械摩擦等,需要通过发酵罐壁、水分蒸发、冷却水等将热量散发出去,最终使发酵罐中的温度保持动态平衡。 ---- 幻灯片 252.pH (1)造成的影响:①pH的改变可以影响酶活性,造成细胞膜通透性改变,影响营养物质的吸收和代谢产物的排出;②影响产物种类,如谷氨酸棒状杆菌在pH为酸性时生成乙酰谷氨酰胺而不是谷氨酸。 ---- 幻灯片 26 (2)采取的措施:在微生物的代谢过程中,产生的二氧化碳、有机酸等会引起培养基中pH的降低,某些无机盐的选择性吸收可能会引起pH的上升,pH的改变不利于生产,因此要及时调整。过酸时加Na2CO3等中和,过碱时加稀盐酸等中和。 ---- 幻灯片 273.溶解氧 (1)造成的影响:①不同代谢类型的微生物对溶氧的要求不同,氧可以促进需氧型微生物的代谢,抑制厌氧型微生物的代谢;②溶氧还可以影响产物的合成,如当氧气不足时,谷氨酸棒状杆菌生成的是乳酸或琥珀酸,而不是谷氨酸。 (2)采取的措施:对需氧型生物进行发酵,发酵过程中要不断地通入无菌空气,并进行搅拌(要合理控制转速);对厌氧型生物进行发酵,要隔绝空气。 ---- 幻灯片 284.营养物质的浓度 C/N、无机盐、维生素等均能影响微生物的生长和代谢产物的积累。如当C/N=3时,谷氨酸棒状杆菌大量合成谷氨酸;当C/N=4时,谷氨酸棒状杆菌大量繁殖而产生的谷氨酸很少。 ---- 幻灯片 29【典例2】 如图所示为发酵工程生产产品的流程图,据图回答: ---- 幻灯片 30 (1)能生产人生长激素的工程菌是通过①________培育的;高产青霉素菌种是通过②培育的,②是________,③是________。 (2)整个过程的中心阶段是发酵,要随时取样检测培养基中的细菌数目、产物浓度等。同时,要严格控制____________________和转速等发酵条件。 (3)若⑥是单细胞蛋白的话,⑥是_______________,氨基酸、维生素属⑦中的_____________产物。 基因工程 诱变育种 细胞工程 溶解氧、温度、pH 微生物菌体 初级代谢 ---- 幻灯片 31 [解析] 一般情况下,从自然界中分离得到的野生菌种不能满足人们的需求,因此需进行改造,常用的措施有基因工程、诱变育种、细胞工程。影响发酵的主要条件有溶解氧、温度、pH等。发酵工程的产品有两类,一是菌体本身,二是代谢产物。 ---- 幻灯片 32【互动探究2】 (·全国Ⅰ理综)下列关于通过发酵工程生产谷氨酸的叙述,错误的是(  ) A.发酵时需不断通入无菌空气,否则会积累乳酸 B.发酵时常采用的培养基为液体天然培养基 C.从自然界分离的野生型菌株可直接用于生产 D.当菌体生长进入稳定期时,补充营养物可提高谷氨酸产量 ---- 幻灯片 33 [解析] 本题以谷氨酸发酵过程为切入点,主要考查与发酵工程相关的知识,熟知发酵工程的基本步骤及每步中需要注意的事项,是解题的关键。发酵工程生产谷氨酸,溶液不足时,会产生乳酸或琥珀酸;培养基中含豆饼的水解液、玉米浆等成分复杂的物质,工业生产常用液体培养基,因此该培养基属于液体天然培养基;从自然界分离的野生型菌株,产量一般都比较低,不能满足工业生产的需要,通常要用人工诱变的方法处理,使菌种产生突变,再从中筛选出符合要求的优良菌种,才能用于生产; ---- 幻灯片 34当菌体生长进入稳定期时,要及时补充营养物质,以满足菌体的营养需求,提高谷氨酸的产量。 [答案] C ---- 幻灯片 35高考链接 ---- 幻灯片 36 (·全国Ⅰ)下列是与微生物培养有关的问题,请回答: (1)某细菌固体培养基的组成成分是KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4、葡萄糖、尿素、琼脂和蒸馏水,其中凝固剂是________,碳源是________,氮源是________。 已知只有能合成脲酶的细菌才能在该培养基上生长,故该培养基属于________培养基。按照化学成分分类,该培养基属于________培养基。从同化作用类型看,用该培养基培养的细菌属于________。 琼脂 葡萄糖 尿素 选择 合成 异养型 ---- 幻灯片 37 (2)将少量细菌接种到一定体积的液体培养基中,适宜条件下培养,定时取样测定菌体数目,以时间为横坐标,以菌体数目的对数为纵坐标,可以得到细菌的________曲线。该曲线中以菌体数目的对数作为纵坐标的原因是______________________________________________________________________________。实验室中,为了获得形态和生理特征一致的菌体,一般应在________期取材;在生产中,常收集培养至________期的细菌用于次生代谢产物的提取。 生长 培养中的细菌以指数形式增殖,取对数便于反映细菌群体的生长规律(其他合理答案也可) 对数 稳定 ---- 幻灯片 38解析:(1)在细菌固体培养基组成成分中,凝固剂是琼脂,碳源是葡萄糖,氮源是尿素;由于只有能合成脲酶的细菌才能在该培养基上生长,从培养基用途上看,该培养基应属于选择培养基;按照培养基的化学成分划分,该培养基应属于合成培养基;由于该细菌利用有机物(葡萄糖)作碳源,故从同化作用类型看,该细菌属于异养型。(2)细菌的生长曲线,反映了细菌群体从开始生长到死亡的动态变化过程,可以分为四个主要时期。 ---- 幻灯片 39其中对数期个体形态和生理特征比较稳定,常作为生产菌种;稳定期菌体内大量积累代谢产物,特别是次级代谢产物(产品),常作为产品收集提取阶段。在绘制细菌生长曲线时,采用菌体数目的对数而未采用菌 体实际数作为纵坐标的原因,是因为前者更方便于用数学 方式绘制生长曲线,反映细菌群体的生长规律。 ----

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