一、选择题(共10个小题，每题6分，共60分)
1．(2012·盐城一模)下列有关果酒和果醋制作的叙述正确的是( )
A．葡萄汁要装满发酵瓶，造成无氧环境，有利于发酵
B．在葡萄酒发酵过程中，每隔12 h左右打开瓶盖一次，放出CO2
C．果酒发酵过程中温度控制在30 ℃，果醋发酵过程中温度控制在20 ℃
D．在果醋发酵过程中，适时通过充气口充入氧气，有利于醋酸菌的代谢
2．(2012·徐州高三考前信息卷)下图实验装置可用于生物技术实践的相关实验，有关叙述错误的是( )
甲 乙
A．装置甲和装置乙都可用于果酒制作
B．装置乙可先用于果酒的制作，后用于果醋的制作
C．利用装置甲制作腐乳时，为了保证腐乳的风味应均匀向装置中加入盐分
D．乙装置的排气口通过一个长而弯曲的胶管，可防止空气中微生物的污染
3．(2012·苏州高三调研)下列有关“利用菜花进行DNA的粗提取与鉴定”实验的叙述中，正确的是( )
A．采用不同浓度的NaCl溶液反复溶解与析出DNA的方法可去除部分蛋白质等杂质
B．在切碎的菜花中加入一定量的蒸馏水，充分研磨后过滤获取滤液
C．用蒸馏水将NaCl溶液浓度调至0.14 mol/L，滤去析出物
D．将白色丝状物溶解在2 mol/L NaCl溶液中，加入二苯胺试剂即呈蓝色
4．(2012·阳江一中三模)下列关于物质的提取和分离的说法，错误的是( )
A．分离纤维素分解菌时，培养基中的纤维素要用苏丹红染色
B．提取鸡血细胞DNA时，需在鸡血细胞液中加入一定量的蒸馏水
C．提取和分离血红蛋白以及血红蛋白纯度鉴定用到的方法有：吸水涨破法、离心法、透析法、凝胶色谱法、电泳法
D．分离细胞中各种细胞器可用差速离心法；验证DNA半保留复制时用同位素标记法和密度梯度离心法
5．(2012·江苏百校联考)下列有关果醋与腐乳制作的比较，错误的是( )
6．(2012·海淀区模拟)通过选择培养基可以从混杂的微生物群体中分离出所需的微生物。在缺乏氮源的培养基上大部分微生物无法生长；在培养基中加入青霉素可以抑制细菌和放线菌；在培养基中加入10%的酚可以抑制细菌和霉菌。利用上述方法能从混杂的微生物群体中分别分离出( )
①大肠杆菌 ②霉菌 ③放线菌 ④固氮细菌
A．④②③ B．①②③
C．①③④ D．③④
7．(2012·兰州一中高三冲刺)“筛选”是生物学中培育生物新类型常用手段，下列有关技术中不能筛选成功的是( )
A．在无氮培养基上筛选圆褐固氮菌
B．基因工程中通过对细胞单独培养并检测目的基因产物进行筛选
C．在培养基中加入高浓度食盐选择大肠杆菌
D．细胞工程中用选择培养基，筛选出杂交瘤细胞，再对选出的杂交瘤细胞逐一克隆或扩增，挑选出产生所需抗体的杂交瘤细胞群
8．(多选)(2012·徐州二模)下列关于花药培养的叙述中，不正确的是( )
A．培养基中的蔗糖能提供营养和调节渗透压
B．选材时可通过镜检确定花粉是否在单核靠边期
C．产生胚状体是花药离体培养中特有的途径
D．脱分化形成愈伤组织的过程能合成大量叶绿素
9．(2012·茂名二模)下列有关生物技术和生物工程的叙述，正确的是( )
A．传统的葡萄酒制作一定需要人工接种菌种
B．制作果醋时，必须向发酵装置中不断补充氧气
C．构建基因表达载体时，必须用限制酶将运载体切开两个切口
D．在进行植物组织培养和动物细胞培养时，细胞都必须先进行脱分化
10．(2012·菏泽六校联考)提取植物芳香油是利用水蒸气将挥发性较强的植物芳香油携带出来，形成油水混合物；然后冷却，将混合物重新分出油层和水层，以此来获得植物芳香油。在此方法中，运用了哪些操作手段( )
①蒸馏 ②压榨 ③萃取 ④干馏 ⑤分液
A．①③ B．①③④
C．①⑤ D．①③⑤
二、非选择题(共4个大题，共40分)
11．(11分)(2012·湖南十二校联考)微生物在人们的生活生产中无处不在，为人们生活增添了诸多乐趣。
(1)很多家庭都会酿酒。
①酿酒时先将米煮熟的主要目的是________ 。
②冷却到30 ℃后才能加酒药的原因是_________ 。
③如果时常开坛盖舀酒，不久酒就会变酸，其原因是_______ 。
(2)中国的臭豆腐驰名中外，历史悠久。臭豆腐外观青色，“闻着臭，吃着香”。在臭豆腐的制备过程中，常用的微生物主要是________，在此过程中，豆腐相当于微生物生长的________。
(3)在腌制泡菜的过程中，起主要作用的微生物是________，用水封坛的作用是______________。
(4)为获得一种能高效降解农药的细菌(目的菌)，往培养基中加入某种化合物，将初步筛选得到的目的菌转至固体培养基上接种菌落；获得菌落后继续筛选，接种过程中接种环常采用________灭菌；实验结束后，使用过的培养基应该进行________处理后才能倒掉，这样做是为了______________________，常用的灭菌方法是________________。
12．(9分)(2012·江苏高三预测题)柑橘果实营养丰富，色香味兼优，柑橘产量居百果之首。既可鲜食，又可加工成以果汁、果酒、果醋等饮料，还可以提取橘皮精油。丰产稳产、经济效益高，是我国南方重要的经济树种。
(1)下图是柑橘果醋的生产工艺，进行酒精发酵时需定期“放气”，原因是________________。进行醋酸发酵时需通过充气口“充气”，原因是________________________________。
(2)下图是提取橘皮精油的两种生产工艺
①冷榨油工艺需要浸石灰水，该步骤的目的是_______ 。
②因过滤得到的橘皮精油还含有少量的水和果蜡，所以两种工艺都需_______ ，使杂质沉淀出来，分离后精制处理，成为最终的橘皮精油。
③压榨后的残渣可采用________________法再进行取油。
13．(8分)(2012·蚌埠一中高三质检)如图为通过花药培养月季花粉植株的一种途径。请回答下列相关问题。
(1)选择花药时，一般要通过________来确定其中的花粉是否处于适宜的发育期，一般来说，在________期，细胞核由中央移向细胞一侧的时期，通常选择________的花蕾，花药培养成功率最高。
(2)上述途径是通过胚状体阶段发育成植株，还可以将花粉在诱导培养基上先形成________________，再将其诱导分化成植株。
(3)某同学在培养过程中发现培养基上感染了几种细菌。若在以尿素为唯一氮源的培养基中加入________指示剂培养几种菌后，指示剂变红就可以鉴定其中含有能够分解尿素的菌；若在以纤维素为唯一碳源的培养基中加入________染料，培养几种菌后，培养基中出现透明圈，就可以鉴定其中含有纤维素分解菌。在培养过程中为了检验制备的培养基是否合格，采取措施是_________ ，观察结果，如果____________ ，说明培养基制备成功，否则需要重新制备。
14．(12分)(2012·学军中学高三模拟)请回答下列与实验室提取芳香油有关问题：
(1)植物芳香油的提取可采用的方法有压榨法、________和________。
(2)芳香油溶解性的特点是不溶于________，易溶于________，因此可用________________作为提取剂来提取芳香油。
(3)橘子果实含有芳香油，通常可用________作为材料提取芳香油，而且提取时往往选用新鲜的材料，理由是________________。
(4)对材料压榨后可得到糊状液体，为除去其中的固体物获得乳状液可采用的方法是________________。
(5)得到的乳状液加入氯化钠并放置一段时间后，芳香油将分布于液体的________层，原因是_______ ，加入氯化钠的作用是________ 。
(6)从乳状液中分离得到的芳香油中要加入无水硫酸钠，此剂的作用是_________ 。
答案及解析
1．【解析】 葡萄汁不能装满发酵瓶，要留1/3空间。发酵过程中，不能打开瓶盖，只能拧松。果酒发酵温度控制在18～25 ℃，果醋发酵是30～35 ℃。醋酸菌是好氧菌，要适时充入氧气。
【答案】 D
2．【解析】 利用甲装置进行腐乳制作时，需加盐可吸出豆腐中的水分，使豆腐变硬，同时盐能抑制微生物的生长，避免豆腐块腐败变质。加盐是逐层加入且随着层数的增加而增加盐量，接近瓶口表面的盐要铺厚一些。
【答案】 C
3．【解析】 为了纯化提取的DNA，需要将滤液作进一步处理。采用不同浓度的NaCl溶液反复溶解，可除去不能溶解的杂质或溶解度低于NaCl的杂质即多种杂质，不只是蛋白质。
【答案】 A
4．【解析】 分离纤维素分解菌时，培养基中加入的是能与培养基中的纤维素形成红色复合物的刚果红，而不是苏丹红染液。
【答案】 A
5．【解析】 醋酸菌对氧气的含量非常敏感，醋酸发酵中必须保证持续通入无菌空气；腐乳制作过程的最后也要装瓶并防止杂菌感染。
【答案】 B
6．【解析】 缺乏氮源的培养基上大部分微生物无法生长，而固氮细菌能生长；在培养基中加入青霉素可以抑制细菌和放线菌，霉菌能生长；在培养基中加入10%的酚可以抑制细菌和霉菌，放线菌能生长。
【答案】 A
7．【解析】 在无氮培养基上大部分微生物不能生长，而固氮菌能生长；检测目的基因是否导入受体细胞可以通过DNA分子杂交、DNA与mRNA杂交或抗原－抗体杂交的方法来达到筛选的目的；在培养基中加入高浓度食盐选择的是金黄色葡萄球菌；对于所需杂交瘤细胞的筛选必须首先筛选出杂交瘤细胞，进而筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞。
【答案】 C
8．【解析】 蔗糖作为溶质，本身就可以产生渗透压，且能提供营养；选择花药时，一般可使用醋酸洋红法或者焙花青－铬钒法通过镜检来确定其中的花粉是否处于适宜的发育期。使用花药离体培养、体细胞离体培养均可产生胚状体；脱分化形成愈伤组织的过程中无真叶的形成，故不会合成大量叶绿素。
【答案】 CD
9．【解析】 传统的葡萄酒制作时若找不到醋酸菌菌种或醋曲，可尝试自然接种；制作果醋时所用到的醋酸菌是好氧菌，将酒精变成醋酸时需要氧气的参与；不同的限制酶切割后产生的末端也不一样，若是平末端，则为一个切口；动物细胞不需脱分化的。
【答案】 B
10．【解析】 在提取植物芳香油的过程中，利用水蒸气将挥发性较强的植物芳香油携带出来，形成油水混合物的过程属于蒸馏；然后冷却，重新分出油层和水层，并将油层提取出来的过程属于分液。
【答案】 C
11．【解析】 (1)①利用热力，将米的大淀粉团膨胀，拉断，发生一定程度的水解；高温加热，杀灭其他杂菌以便于霉菌的利用。
②将水解后的淀粉冷却是为了避免因温度过高将酵母菌杀死，影响下一步的乙醇发酵。
③时常开坛盖舀酒，使氧气充足，在酒的表面会有大量醋酸菌繁殖，醋酸菌将酒精氧化为醋酸。
(2)豆腐的发酵中参与的微生物很多如青霉、酵母、曲霉、毛霉等，其中起主要作用的是毛霉。毛霉等微生物将豆腐中的营养基质如蛋白质、脂肪等分解，豆腐相当于培养基。
(3)泡菜的制作离不开乳酸菌，而乳酸菌为厌氧细菌，在无氧的情况下才能生存，故用水封坛的作用是制造缺氧环境。
(4)微生物的接种工具如接种环经常直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧，可迅速灭菌，此种方法称为灼烧灭菌；为了防止杂菌释放到环境中造成环境污染，实验结束后要对使用过的器具、培养基进行灭菌处理。实验物品的灭菌方法易采取高压蒸汽灭菌。
【答案】 (1)①杀灭其他杂菌，使淀粉发生一定程度的水解 ②太高的温度会抑制甚至杀死酵母菌 ③醋酸菌在有氧条件下，将酒精氧化为醋酸 (2)毛霉 培养基 (3)乳酸菌 制造缺氧环境 (4)灼烧 灭菌 防止造成环境污染 高压蒸汽灭菌
12．【解析】 本题以柑橘为题材综合考查了酒精发酵、醋酸发酵以及橘皮精油的提取等内容。(1)酒精发酵过程中酵母菌进行无氧呼吸在产生酒精的过程中也会产生二氧化碳，使瓶内压上升，所以应定期“放气”。醋酸菌属于好氧菌，所以在产生醋酸的过程中应提供氧气，即进行“充气”。(2)常规方法制备橘皮精油的过程中为了防止橘皮在压榨时滑脱，需要用石灰水浸泡，并可有效提高出油率。除去橘皮油的水和果蜡的常用方法是静置或者离心。压榨后的残渣中含有少量的精油，最好采用水蒸气蒸馏的方法进一步提取。
【答案】 (1)酵母菌无氧呼吸会产生CO2 醋酸菌属于好氧菌，醋酸发酵需要O2 (2)①防止压榨时滑脱，提高出油率 ②5～10 ℃下静置5～7 d(或“离心”) ③水蒸气蒸馏
13．【解析】 (1)通过对花药进行染色后制片利用显微镜进行观察来确定其中的花粉是否处于适宜的发育期；花期早期时的花药比后期的更容易产生花粉植株。而细胞核由中央移向细胞一侧的时期即单核期，对离体刺激敏感，易诱导成功；而盛开的或略微开放的花，都不宜做实验材料，因为花瓣松动，给材料的消毒等带来困难。
(2)花粉培养产生花粉植物由两种途径，另一途径为花药中的花粉经脱分化形成愈伤组织经过再分化形成丛芽，经诱导生根发育成植株。
(3)对微生物进行筛选时，根据向其生长的选择培养基中加入特定的指示剂后的显示反应可确定微生物的种类。如含有能够分解尿素的菌的筛选可向特定的培养基中加入酚红；鉴定其中含有纤维素分解菌时可加入刚果红；为了检验制备的培养基是否合格，可设置对照组即将接种后的培养基和一个未接种的培养基同时在适宜条件下培养，如果未接种的培养基无菌落生长，说明培养基制备成功，否则需要重新制备。
【答案】 (1)镜检 单核 完全未开放 (2)愈伤组织
(3)酚红 刚果红 将接种后的培养基和一个未接种的培养基同时在适宜条件下培养 未接种的培养基无菌落生长
14．【解析】 本题考查芳香油的提取方法、原理、材料选择及依据压榨法提取的主要操作方法和目的等。(1)植物芳香油的提取可采用的方法有压榨法、蒸馏法和萃取法等。(2)芳香油溶解性的特点是不溶于水，易溶于有机溶剂，因此可用有机溶剂作为提取剂来提取芳香油。(3)一般采用新鲜的橘皮来提取橘皮精油，因为新鲜的橘皮中芳香油含量较高。(4)除去液体中的固体常用方法是过滤。(5)芳香油密度比水小，且不溶于水，会浮在液体的表面。加入氯化钠会增加水层密度，使油和水分层。(6)无水硫酸钠的作用是吸收芳香油中残留的水分。
【答案】 (1)蒸馏法 萃取法 (2)水 有机溶剂 有机溶剂 (3)橘子皮 芳香油含量较高 (4)过滤
(5)上 油层的密度比水层小 增加水层密度，使油和水分层 (6)吸收芳香油中残留的水分
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