2012届高考生物二轮定时练习：传统发酵技术应用
一、选择题
1．(2011·南京调研)某同学在制作腐乳的过程中，发现豆腐腐败变质，下列不属于其原因的是( )
A．用盐腌制时，加盐量太少
B．用来腌制腐乳的玻璃瓶，没有用沸水消毒
C．制作卤汤时，料酒加的量较多
D．装瓶后，没有将瓶口密封
解析： 本题考查影响腐乳品质的因素。豆腐腐败变质是杂菌繁殖造成的。用来腌制腐乳的玻璃瓶，没有用沸水消毒，装瓶后，没有将瓶口密封，用盐腌制时，加盐量太少或制作卤汤时加料酒量太少都会致使杂菌大量繁殖。相反，如果料酒加入过多，不会致使杂菌大量繁殖。
答案： C
2．在一普通锥形瓶中，加入含有酵母菌的葡萄糖溶液，如下面左图，在右图的相关坐标曲线图中，正确的是( )
A．①②③ B．②③④
C．①③④ D．①②④
答案： C
3．如右图是微生物平板划线示意图。划线的顺序为12345。下列操作方法正确的是( )
A．操作前要将接种环放在火焰边灼烧灭菌
B．划线操作须在火焰上进行
C．在5区域中才可以得到所需菌落
D．在12345区域中划线前后都要对接种环灭菌
解析： 本题考查平板划线操作方法。在每次划线前后都要对接种环进行灭菌，接种环的灭菌方法应是在火焰上灼烧，接种时划线操作是在火焰边进行。在5个区域中，只要有单个活细菌，通过培养即可获得所需菌落。
答案： D
4．(2009·安徽理综)下列是关于“检测土壤中细菌总数”实验操作的叙述，其中错误的是( )
A．用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，经高温、高压灭菌后倒平板
B．取104、105、106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1 mL，分别涂布于各组平板上
C．将实验组和对照组平板倒置，37 ℃恒温培养24～48小时
D．确定对照组无菌后，选择菌落数在300以上的实验组平板进行计数
解析： 配制培养基必须经过计算、称量、溶化、高温高压灭菌、倒平板等步骤。测定土壤中细菌总数取104、105、106倍的土壤稀释液。细菌的培养一般是30～37 ℃恒温培养1～2 d。计数时，为保证结果准确，一般选择菌落数在30～300之间的平板进行计数。
答案： D
5. 在缺乏氮源的培养基上大部分微生物无法生长；在培养基中加入青霉素可以抑制细菌和放线菌；在培养基中加入10%酚可以抑制细菌和霉菌。利用上述选择培养基依次能从混杂的微生物群体中分离出( )
A．乳酸菌、金黄色葡萄球菌、放线菌
B．固氮细菌、大肠杆菌、放线菌
C．固氮细菌、霉菌、放线菌
D．固氮细菌、金黄色葡萄球菌、放线菌
解析： 综合分析可知选择培养基依次选择的是：固氮细菌、霉菌和放线菌。
答案： C
6．(2011·南通调研)果酒和果醋制作过程中，发酵条件的控制至关重要，相关措施正确的是( )
A．葡萄汁要装满发酵瓶，造成无氧环境，有利于发酵
B．在葡萄酒发酵过程中，每隔12 h左右打开瓶盖一次，放出CO2
C．果酒发酵过程中温度控制在30 ℃，果醋发酵过程中温度控制在20 ℃
D．在果醋发酵过程中，要适时通过充气口充气，有利于醋酸菌的代谢
解析： 本题考查果酒和果醋的制作条件。葡萄汁装入发酵瓶时，要留约1/3的空间。在葡萄酒发酵过程中，每隔12 h左右拧松瓶盖一次，放出CO2，注意不能打开瓶盖，防止杂菌污染。果酒发酵过程中温度控制在18～25 ℃，果醋发酵过程中温度控制在30～35 ℃。果醋发酵是需氧发酵，发酵过程中要适时通过充气口充气。
答案： D
二、非选择题
7．(2011·青岛市高三统一检测)苹果醋是指以苹果汁经发酵而成的苹果原醋，再兑以苹果汁等原料而成的饮品。既有淡淡的醋味，又有果汁的香甜，喝起来非常爽口。苹果醋还能保健养生、消除疲劳、美容养颜，是目前大众非常喜爱的饮品。下图是苹果醋的制作流程简图，请据图回答：
(1)为了提高该微生物的利用率，最好用________方法对其进行固定。若要检测是否产生了苹果酒可用________试剂进行检测。
(2)过程②中使用到的微生物是________，该微生物的代谢类型是________。该微生物可以从食醋中分离纯化获得，方法是：第一步：配置培养基。该培养基必须含有微生物生长所需要的________________________等基本营养成分。
第二步：对培养基用____________方法进行灭菌。
第三步：接种。微生物常用的接种方法有____________________________。
第四步：培养。温度控制在________。
第五步：挑选符合要求的菌落。
答案： (1)包埋 重铬酸钾 (2)醋酸菌 异养需氧型 水、碳源、氮源、无机盐 高压蒸汽 平板划线法、稀释涂布平板法 30～35 ℃
8．(2011·华南师大附中综合测试)生物乙醇是以生物为原料生产的可再生能源。我国利用农作物废弃物(秸秆)生产乙醇，其技术流程为：纤维素酶解→酵母发酵→蒸馏→成品。纤维素酶的成本能否下降，是能否实现乙醇工业化生产的关键因素。纤维素酶可以从能分解纤维素的细菌培养液中提取。某同学设计了如下分离土壤中纤维素分解菌的实验流程：土壤取样→选择培养→梯度稀释→鉴别培养。
(1)最好选择怎样的环境采集土样？_______________________________________________________________
_________________________________________________________。
(2)以下是一种培养基配方：纤维素粉5 g、NaNO3 1 g、Na2HPO4·7H2O 1.2 g、KH2PO4 0.9 g、MgSO4·7H2O 0.5 g、KCl 0.5 g、酵母膏0.5 g、水解酪素0.5 g(蒸馏水定容到1 000 mL)。该培养基能够增加样品中纤维分解菌的浓度，其原理是____________________________________________________________________
________________________________________________________________________。
(3)为了鉴别纤维素分解菌和进一步纯化菌种，可以在鉴别培养上加入________染液，将筛选获得的菌液稀释后用________的方法接种到鉴别培养基上，然后挑选产生________的菌落作为菌种进行扩大培养。
(4)纤维素分解菌培养液中的纤维素酶产量如何呢？请设计实验进行检测。________________________________________________________________________
________________________________________________________________________。
解析： 本题考查土壤中纤维素分解菌的分离与鉴定的相关知识。富含纤维素的土壤中，含有以纤维素为碳源的纤维素分解菌，且数量较多；题目中给出的培养基能够为产生纤维素酶的微生物提供碳源，不能分解纤维素的微生物由于缺乏碳源而不能正常生长繁殖，因此该培养基具有选择作用；纤维素量一定时，在一定范围内，纤维素酶产量与分解产生的葡萄糖量成正比。
答案： (1)纤维素丰富的土壤环境 (2)培养基中纤维素是主要碳源，有利于纤维素分解菌生长，同时抑制其他微生物生长(3)刚果红 涂布平板 透明圈 (4)向定量纤维素分解菌培养液中加入定量纤维素，定时测定葡萄糖产量的变化
9．(2011·山东省沂南一中全真模拟)生物技术在食品加工中应用十分广泛，如果酒、果醋、腐乳、泡菜就是生活中常见的例子。分析回答：
(1)每当到了丰收的季节，苹果堆满了仓库，但如果交通不便，就会有很多苹果因保存不当或不能及时运出，而渐渐腐烂变质，苹果腐烂的原因是①____________________________；②微生物侵染。其中能使苹果腐烂的微生物的同化作用类型是__________。为了减少损失，提高产品的经济效益，人们想到了榨取果汁，要想使果汁尽可能榨出来，应加入________，在该物质的作用下，果胶分解成可溶性的____________。
(2)在果醋发酵过程中，可选用________简单又安全的方法测出是否有醋酸生成。
(3)生物技术在其他方面也有重要的应用，如血红蛋白的提取和分离胡萝卜素等，血红蛋白的提取和分离实验一般分为样品处理、粗分离、纯化和纯度鉴定，其中粗分离常用________法，纯化则采用____________法。胡萝卜素的提取用________法。
答案： (1)无氧呼吸产生酒精使细胞死亡 异养型 果胶酶 半乳糖醛酸 (2)pH试纸 (3)透析 凝胶色谱法 萃取法
10．(2011·广州检测)急性肠胃炎、手足口病分别是由细菌、病毒通过消化道进入人体导致的。因此检验饮用水的细菌含量和病毒含量是有效监控疾病发生的必要措施，请回答下列与检验饮用水有关的问题：
(1)检验大肠杆菌的含量时，通常将水样进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的水样用涂布器分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养，记录菌落数量，这种方法称为____________________。下面四种菌落分布图中，不可能用该方法得到的是________。
(2)用该方法统计样本菌落数时是否需要设置对照组？________，为什么？________________________________________________________________________。
(3)如分别取0.1 mL已稀释103倍的水样分别涂布到三个琼脂固体培养基的表面进行培养，培养基记录到大肠杆菌的菌落数分别为55、56、57，则每升原水样中大肠杆菌数为____________。
(4)已知大肠杆菌能发酵乳糖并产酸产气，现提供足量的已灭菌的乳糖蛋白胨培养液和具塞试管，应如何判断待检水样中是否含有大肠杆菌？________________________________________________________________________
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________________________________________________________________________
________________________________________________________________________。
(5)手足口病的病原体是柯萨奇病毒。如需检测水样中是否有柯萨奇病毒，可以通过检测柯萨奇病毒特有的DNA片段来实现。但是水样中的病毒DNA极少，这时可以通过________技术扩增病毒DNA片段，然后进行检测。采用这种技术进行DNA扩增时，一定需要用到的酶是________________________________________________________________________。
解析： 题干信息显示为通过涂布水样于平板培养基上后用菌落计数细菌数，故为稀释涂布平板法。将0.1 mL稀释了103倍的水样涂布到琼脂固体培养基上，得到的菌落数为55、56、57，平均为56个，则每升水中大肠杆菌数为(56÷0.1)×103×103＝5.6×108个。DNA片段的扩增常用PCR技术，此技术不需解旋酶，但需要耐高温的DNA聚合酶。
答案： (1)稀释涂布平板法 D (2)需要设置(对照组) 因为需要判定培养基是否被杂菌污染(培养基灭菌是否合格)
(3)5.6×108个 (4)通过无菌操作向试管内注入一定量待检水样，再注入已灭菌的乳糖蛋白胨培养液将试管充满，塞上塞子，混匀后置于37 ℃恒温箱培养24 h。试管内有气泡生成的说明水样中有大肠杆菌 (5)PCR 耐高温的DNA聚合酶
11．富集培养是微生物学中强有力的技术手段之一。主要是指利用不同微生物间生命活动特点的不同，制定环境条件，使仅适应该条件的微生物旺盛生长，从而使其在群落中的数量大大增加，人们能够更容易地从自然界中分离得到所需的特定微生物。富集条件可根据所需分离的微生物的特点，从物理、化学、生物及综合多个方面进行选择，如温度、pH、紫外线、高压、光照、氧气、营养等许多方面。下图描述了采用富集方法从土壤中分离能降解酚类化合物对羟基苯甲酸的微生物的实验过程。
(1)本实验所需培养基为____________，碳源为________________________________________________________________________。
(2)实验原理是____________________________________________________________
________________________________________________________________________
________________________________________________________________________。
(3)①→③重复培养的目的是_______________________________________________。
(4)⑤菌落中大部分是降解__________________的微生物。
(5)⑥为________组，⑦为________组，设置⑥的目的是
________________________________________________________________________
________________________________________________________________________。
(6)⑤→⑥采用____________法接种到⑥的培养基中，在操作过程中为防止污染应注意的事项是
________________________________________________________________________
________________________________________________________________________
________________________________________________________________________。
解析： 从混合物中分离某种微生物要用选择培养基，利用该分离对象对某一营养物质有“嗜好”的原理，专门在培养基中加入该营养物质，从而使其成为一种“加富”培养基，可使该微生物大量繁殖，在数量上超过原有占优势的微生物，以达到富集培养的目的，用于“加富”的一些物质主要是一些特殊的碳源和氮源。
答案： (1)选择培养基 对羟基苯甲酸 (2)利用以对羟基苯甲酸为唯一碳源的选择培养基，经富集培养，分离出能降解酚类化合物对羟基苯甲酸的微生物 (3)增大对羟基苯甲酸微生物的比例 (4)对羟基苯甲酸 (5)对照 实验 说明通过富集培养的确得到了能降解对羟基苯甲酸的微生物 (6)单细胞挑取 接种环在火焰上灼烧灭菌，烧红的接种环在火焰旁空气中冷却，同时在火焰旁打开皿盖挑取菌落接种到试管中，并塞好棉塞，接种环在火焰上灼烧，杀灭残留物
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