选修三《现代生物科技专题》专题一 基因工程
测试题（中图版选修3）
1．(2011·苏州模拟)下图为DNA分子在不同酶的作用下所发生的变化，图中依次表示限制性
内切酶、DNA聚合酶、DNA连接酶、解旋酶作用的正确顺序是 ( )
A．①②③④ B．①②④③
C．①④②③ D．①④③②
解析：限制性内切酶的作用是切割磷酸二酯键(①)；DNA聚合酶的作用是在有模板的
条件下催化合成DNA子链，形成新的DNA分子(④)；DNA连接酶的作用是连接磷酸
二酯键，即将2个DNA分子末端的缺口缝合起来(②)；解旋酶的作用是使双链DNA解
旋(③)。
答案：C
2．(2011·福州模拟)下图是获得抗虫棉的技术流程示意图。卡那霉素抗性基因(kanr)常作为
标记基因，只有含卡那霉素抗性基因的细胞才能在卡那霉素培养基上生长。下列叙述正
确的是 ( )
A．构建重组质粒过程中需要限制性内切酶和DNA连接酶
B．愈伤组织的分化产生了不同基因型的植株
C．卡那霉素抗性基因(kanr)中有该过程所利用的限制性内切酶的识别位点
D．抗虫棉有性生殖后代能保持抗虫性状的稳定遗传
解析：质粒与目的基因结合时需要用同一种限制性内切酶切割，用DNA连接酶连接；
愈伤组织由相同细胞分裂形成，分化后产生相同基因型的植株；卡那霉素抗性基因作
为标记基因不能有限制性内切酶的切割位点；抗虫棉有性生殖后代可能会发生性状分
离，抗虫性状不一定能稳定遗传。
答案：A
3．科学家在培育抗虫棉时，经过了许多复杂的过程和不懈的努力，才获得成功。起初把苏
云金芽孢杆菌的抗虫基因插入载体质粒中，然后导入棉花的受精卵中，结果抗虫基因在
棉花体内没有表达。然后在插入抗虫基因的质粒中插入启动子(抗虫基因首端)，导入棉
花受精卵，长成的棉花植株还是没有抗虫能力。科学家又在有启动子、抗虫基因的质粒
中插入终止子(抗虫基因末端)，导入棉花受精卵，结果长成的植株有抗虫能力。由以上
过程推知，作为重组载体应具备的结构是 ( )
A．目的基因、启动子
B．目的基因、终止子
C．目的基因、启动子、终止子
D．目的基因、启动子、终止子、标记基因
解析：基因表达载体的构建是基因工程的基本步骤也是核心，其目的是使目的基因在
受体细胞中稳定存在，并且可以遗传给下一代，同时使目的基因能够表达和发挥作
用。重组载体组成应有：目的基因、启动子、终止子和标记基因。
答案：D
4．(2011·诸暨模拟)采用基因工程技术将人凝血因子基因导入山羊受精卵，培育出了转基因
羊。但是人凝血因子只存在于该转基因羊的乳汁中。下列有关叙述，正确的是 ( )
A．人体细胞中凝血因子基因的碱基对数目，小于凝血因子氨基酸数目的3倍
B．可用显微注射技术将含有人凝血因子基因的重组DNA分子导入羊的受精卵
C．在该转基因羊中，人凝血因子基因只存在于乳腺细胞，而不存在于其他体细胞中
D．人凝血因子基因开始转录后，DNA连接酶以DNA分子的一条链为模板合成mRNA
解析：人体细胞内遗传信息的表达过程中存在终止密码子等不编码氨基酸的情况，因
此，细胞中凝血因子基因的碱基对数目应大于凝血因子氨基酸数目的3倍；在该转基因
羊中，人凝血因子基因存在于所有的体细胞中；催化mRNA合成的酶是RNA聚合酶。
答案：B
5．(2010·浙江理综，2)在用基因工程技术构建抗除草剂的转基因烟草过程中，下列操作错
误的是 ( )
A．用限制性核酸内切酶切割烟草花叶病毒的核酸
B．用DNA连接酶连接经切割的抗除草剂基因和载体
C．将重组DNA分子导入烟草原生质体
D．用含除草剂的培养基筛选转基因烟草细胞
解析：限制性核酸内切酶用于提取目的基因和切割载体，烟草花叶病毒的遗传物质是
RNA，不能用限制性核酸内切酶切割，A项错误；DNA连接酶可以连接具有相同黏性
末端的目的基因和载体，B项正确；受体细胞可以是受精卵和体细胞，也可以是去除
细胞壁的原生质体，C项正确；目的基因为抗除草剂基因，所以未成功导入目的基因
的细胞不具有抗除草剂的能力，筛选时应该用含除草剂的培养基筛选转基因细胞，D
项正确。
答案：A
6．(2010·全国Ⅱ，5)下列叙述符合基因工程概念的是 ( )
A．B淋巴细胞与肿瘤细胞融合，杂交瘤细胞中含有B淋巴细胞中的抗体基因
B．将人的干扰素基因重组到质粒后导入大肠杆菌，获得能产生人干扰素的菌株
C．用紫外线照射青霉菌，使其DNA发生改变，通过筛选获得青霉素高产菌株
D．自然界中天然存在的噬菌体自行感染细菌后其DNA整合到细菌DNA上
解析：基因工程是在生物体外，通过对DNA分子进行人工“剪切”和“拼接”，对生
物的基因进行改造和重新组合，然后导入受体细胞内进行无性繁殖，使重组基因在受
体细胞内表达，产生出人类所需要的基因产物。所以B为基因工程，而A为动物细胞工
程，C为诱变育种，D无人为因素不属于基因工程。
答案：B
7．通过DNA重组技术使原有基因得以改造的动物称为转基因动物。运用这一技术使羊奶
中含有人体蛋白质，下图表示了这一技术的基本过程，在该工程中所用的基因“剪刀”
能识别的序列和切点是—G↓GATCC—，请回答：
(1)从羊染色体中“剪下”羊蛋白质基因的酶是__________，人体蛋白质基因“插入”
后连接在羊体细胞染色体中需要的酶是________。
(2)请画出质粒被切割形成黏性末端的过程图。
解析：(1)考查在基因工程中，科学家所用的“剪刀”、“针线”。(2)按碱基互补原
则，写出所给片段的互补部分，再按切割位点，将其分开，即。
答案：(1)限制性内切酶 DNA连接酶
8．(2010·江苏生物，27)下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点，图1、图2中箭
头表示相关限制酶的酶切位点。请回答下列问题：
限制酶
BamH Ⅰ
Hind Ⅲ
EcoR Ⅰ
SmaⅠ
识别序列及
切割位点
G↓GATC C
C CTAC↑G
A↓AGCT T
T TCGA↑A
G↓AATT C
C TTAA↑G
CCC↓GGG
GGG↑CCC
(1)一个图1所示的质粒分子经SmaⅠ切割前后，分别含有________个游离的磷酸基团。
(2)若对图中质粒进行改造，插入的SmaⅠ酶切位点越多，质粒的热稳定性越________。
(3)用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒，不能使用SmaⅠ切割，原因是
__________________。
(4)与只使用EcoRⅠ相比较，使用BamHⅠ和HindⅢ两种限制酶同时处理质粒、外源
DNA的优点在于可以防止________。
(5)为了获取重组质粒，将切割后的质粒与目的基因片段混合，并加入________酶。
(6)重组质粒中抗生素抗性基因的作用是为了________。
(7)为了从cDNA文库中分离获取蔗糖转运蛋白基因，将重组质粒导入丧失吸收蔗糖能
力的大肠杆菌突变体，然后在________的培养基中培养，以完成目的基因表达的初步检
测。
解析：本题综合考查基因工程的过程及应用。(1)质粒是双链环状DNA分子，在Sma Ⅰ
切割前没有游离的磷酸基团，Sma Ⅰ作用于两个核苷酸之间的磷酸二酯键，切割产生
的DNA片段是平末端，因而质粒经切割后含有2个游离的磷酸基团。(2)质粒的热稳定
性主要由氢键的数量决定，氢键数量越多，质粒的热稳定性越高，反之则低。DNA分
子中A与T之间存在2个氢键，C与G之间存在3个氢键，因此DNA分子中G—C
碱基对越多，热稳定性越高。Sma Ⅰ识别CCCGGG序列，并在C和G之间将这段序列
切开，也就是质粒中Sma Ⅰ酶切位点越多，G—C碱基对越多，热稳定性越高，(3)据
图1可知，Sma Ⅰ切割的位点在抗生素抗性基因之中，抗生素抗性基因是标记基因，应
尽量避免破坏。据图2可知Sma Ⅰ切割的位点在目的基因之中，破坏了目的基因，
所以不能使用Sma Ⅰ切割。(4)用同种限制酶切割后的质粒和目的基因，在基因表达载
体构建时，常形成三种直接方式，其中目的基因与目的基因的连接、质粒与质粒的连接
是无效的连接，用两种限制酶可避免此类现象。(5)基因表达载体的构建过程中需加DNA
连接酶，连接脱氧核糖和磷酸。(6)抗生素抗性基因属于标记基因，供重组DNA的鉴定
和选择。(7)目的基因是蔗糖转运蛋白基因，将其导入丧失吸收蔗糖能力的大肠杆菌突
变体后，应进行目的基因的检测与鉴定，可根据受体细胞是否含有蔗糖转运蛋白，即是
否具备吸收蔗糖的能力判断基因工程是否成功，因而可在含有蔗糖(唯一碳源)的培养基
中培养。
答案：(1)0、2
(2)高
(3)Sma Ⅰ会破坏质粒的抗性基因、外源DNA中的目的基因
(4)质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化
(5)DNA连接
(6)鉴别和筛选含有目的基因的细胞
(7)蔗糖为唯一含碳营养物质
9．(2008·山东理综)为扩大可耕地面积，增加粮食产量，黄河三角洲等盐碱地的开发利用备
受关注。我国科学家应用耐盐基因培育出了耐盐水稻新品系。
(1)获得耐盐基因后，构建重组DNA分子所用的限制性内切酶作
用于图中的________处，DNA连接酶作用于________处。(填“a”或“b”)
(2)将重组DNA分子导入水稻受体细胞的常用方法有农杆菌转化法和
________法。
(3)由导入目的基因的水稻细胞培养成植株需要利用________技术，该技术的核心是
________和________。
(4)为了确定耐盐转基因水稻是否培育成功，既要用放射性同位素标记的________作探
针进行分子杂交检测，又要用________方法从个体水平鉴定水稻植株的耐盐性。
解析：本题以“科学家应用耐盐基因培育出了耐盐水稻新品系”为背景，考查了《现代
生物科技专题》中的有关基因工程和植物细胞工程的基本内容。基因工程中的工具酶
——限制酶和DNA连接酶的作用是断开或连接两核苷酸间的磷酸二酯键。将目的基因
导入植物受体细胞常用的方法是农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法。目的基因的
检测与鉴定，常利用DNA分子杂交技术(探针)等分子水平的检测和个体生物学水平的
鉴定。植物组织培养的基本过程是植物在离体状态下，进行脱分化与再分化。
答案：(1)a a (2)基因枪(花粉管通道) (3)植物组织培养 脱分化(去分化) 再分化
(4)耐盐基因(目的基因) 一定浓度盐水浇灌(移栽到盐碱地中)
10．(2011·济南模拟)下图为利用生物技术获得生物新品种的过程，据图回答：
(1)在基因工程中，A表示________，如果直接从苏云金杆菌中获得抗虫基因，①过程
使用的酶区别于其他酶的特点是________，B表示________。
（2）B→D的过程中，若使用的棉花受体细胞为体细胞，⑤表示的生物技术是________。
要确定目的基因(抗虫基因)导入受体细胞后，是否能稳定遗传并表达，需进行检测和鉴
定工作，请写出在个体水平上的鉴定过程：
________________________________________________________________________
________________________________________________________________________
________________________________________________________________________。
解析：(1)图中A、B分别表示目的基因、重组DNA；根据酶的专一性特点，①过程使
用的酶是限制性核酸内切酶，其能够识别特定的脱氧核苷酸序列。（2）B→D的过程是
转基因植物的培育过程，其需要的生物技术是植物组织培养；在检测转基因棉花中的毒
蛋白基因(目的基因)是否表达时，可让害虫吞食转基因棉花的叶子，观察害虫的存活情
况，以确定其是否具有抗虫性状。
答案：(1)目的基因 能够识别特定的脱氧核苷酸序列 重组DNA (2)植物组织培养
让害虫吞食转基因棉花的叶子，观察害虫的存活情况，以确定转基因棉花是否具有抗虫
性状
11．(2011·潍坊模拟)已知SARS是由一种RNA病毒感染所引起的疾病。SARS病毒表面的S
蛋白是主要的病毒抗原，在SARS病人康复后的血清中有抗S蛋白的特异性抗体。某
研究小组为了研制预防SARS病毒的疫苗，开展了前期研究工作。其简要的操作流程如
下：
(1)实验步骤①所代表的反应过程是
________________________________________________________________________。
(2)步骤②构建重组表达载体A和重组表达载体B必须使用
________________________________________________________________________。
(3)如果省略步骤②而将大量扩增的S基因直接导入大肠杆菌，一般情况下，不能得到
表达的S蛋白，其原因是S基因在大肠杆菌中不能________，也不能______________。
(4)为了检验步骤④所表达的S蛋白是否与病毒S蛋白有相同的免疫反应特征，可用
________________与________________进行抗原—抗体特异性反应实验，从而得出结
论。
(5)步骤④和⑥的结果相比，原核细胞表达的S蛋白与真核细胞表达的S蛋白的氨基酸
序列________(填“相同”或“不同”)，根本原因是
________________________________________________________________________。
解析：本题考查基因工程的工具及操作步骤和学生识图能力。(1)图中①RNA→DNA表
示通过逆转录方式获得目的基因。(2)基因表达载体构建时，需要利用限制酶对运载体
和目的基因进行剪切，形成黏性末端，然后用DNA连接酶将目的基因和载体连接起来，
形成重组载体。(3)目的基因导入受体细胞后，需要借助于载体在受体细胞中进行复
制而扩增目的基因，从而获得大量的表达产物，而直接导入则容易被受体细胞中的DNA
酶所水解，导致得不到表达产物。(4)S蛋白为SARS病毒表面主要的病毒抗原，因此用
抗原—抗体特异性反应实验可检测其是否具有同样的抗原性。(5)步骤④和⑥相比，基
因相同，只是导入的受体细胞的种类不同，因为真核生物和原核生物共用一套密码子，
所以表达产物相同。
答案：(1)逆转录
(2)限制性内切酶和DNA连接酶
(3)复制 合成S基因的mRNA
(4)大肠杆菌中表达的S蛋白 SARS康复病人血清
(5)相同 表达蛋白质所用的基因相同
12．干扰素是动物体内合成的一种蛋白质，可以用于治疗病毒感染和癌症，但体外保存相当
困难，如果将其分子上的一个半胱氨酸变成丝氨酸，就可在－70℃条件下保存半年，给
广大患者带来福音。
(1)蛋白质的合成是受基因控制的，因此获得能够控制合成“可以保存的干扰素”的基
因是生产的关键，依据蛋白质工程原理，设计实验流程，让动物生产“可以保存的干扰
素”：
(2)基因工程和蛋白质工程相比较，基因工程在原则上只能生产________的蛋白质，不
一定符合________需要。而蛋白质工程是以蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关
系作为基础，通过________或________，对现有蛋白质进行________，或制造一种新的
蛋白质，以满足人类的生产和生活需要。
(3)蛋白质工程实施的难度很大，原因是蛋白质具有十分复杂的________结构。
(4)对天然蛋白质进行改造，应该直接对蛋白质分子进行操作，还是通过对基因的操作
来实现？______________________________________________ ___________。
原因是：_______________________________________________ _____。
解析：本题综合了蛋白质工程与基因工程的异同，并考查了蛋白质工程的原理及在生产
实践中的应用。蛋白质工程是研究多种蛋白质的结构和功能、蛋白质折叠、蛋白质分子
设计等一系列分子生物学基本问题的一咱新型的、强有力的手段。通过对蛋白质工程的
研究，可以深入地提示生命现象的本质和生命活动的规律。基因工程遵循中心法则，从
DNA→mRNA→蛋白质折叠产生功能，基本上是生产出自然界已有的蛋白质。蛋白质
工程是按照以下思路进行的：确定蛋白质的功能→蛋白质应有的高级结构→蛋白质应具
备的折叠状态→应有的氨基酸序列→应有的碱基排列→创造出自然界不存在的蛋白质。
答案：(1)预期蛋白质的功能 蛋白质三维结构 应有的氨基酸序列 相应的脱氧核苷
酸序列(基因) (2)自然界已存在 人类生产和生活的 基因修饰 基因合成
改造 (3)空间(或高级) (4)应该从对基因的操作来实现对天然蛋白质的改造 第一，任
何一种天然蛋白质都是由基因编码的，改造了基因也就是对蛋白质进行了改造，而且改
造过的蛋白质可以通过改造过的基因遗传下去。如果对蛋白质直接改造，即使改造成功，
被改造过的蛋白质分子还是无法遗传；其次，对基因进行改造比对蛋白质直接进行改造
要容易操作，难度要小得多
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