1．将接种后的培养基和一个未接种的培养基都放入37 ℃恒温箱的目的是
( )。
A．对比观察培养基有没有被微生物利用
B．对比分析培养基上是否生有杂菌
C．没必要放入未接种的培养基
D．为了下次接种时再使用
解析 通过设计对照实验，目的是为了检测培养基制备是否成功，即是否被污染了。
答案 B
2．可以鉴定出分解尿素的细菌的方法是
( )。
A．以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂
B．以尿素为唯一氮源的培养基中加入二苯胺试剂
C．以尿素为唯一氮源的培养基中加入刚果红试剂
D．以尿素为唯一氮源的培养基中加入双缩脲试剂
解析 尿素在尿素分解菌的作用下分解产生氨和CO2，氨会使培养基的碱性增强，pH升高，酚红指示剂变红。
答案 A
3．下列关于微生物分离和培养的有关叙述，错误的是
( )。
A．微生物培养前，需对培养基进行消毒
B．测定土壤样品中的细菌数目，常用菌落计数法
C．分离土壤中不同的微生物，要采用不同的稀释度
D．分离能分解尿素的细菌，要以尿素作为培养基中唯一的氮源
解析 微生物培养前，需对培养基进行灭菌，而不是消毒；测定土壤样品中的细菌数目，常用菌落计数法而一般不用活菌计数；分离土壤中不同的微生物，要采用不同的稀释度以便能从中选择出菌落在30～300间的平板进行计数；分离能分解尿素的细菌，要以尿素作为培养基中唯一的氮源。
答案 A
4．下列说法错误的是
( )。
A．因为土壤中各类微生物的数量不同，所以为获得不同类型的微生物，要按不同的稀释倍数进行分离
B．测定土壤中细菌的总量和测定土壤中能分解尿素的细菌的数量，选用的稀释范围不同
C．只有得到了3个或3个以上菌落数目在30～300的平板，才说明稀释操作比较成功，并能够进行菌落的计数
D．牛肉膏蛋白胨培养基的菌落数明显大于选择培养基的数目，说明选择培养基已筛选出一些细菌菌落
解析 样品的稀释度直接影响平板上生长的菌落数目，土壤中各类微生物数量不同，含量最多的是细菌，大约占70%～90%，其次是放线菌，最少是真菌，所以为获得不同类型的微生物，再按不同稀释倍数进行分离；在同一稀释度下只要得到两个或两个以上的菌落数目在30～300的平板，就说明稀释操作比较成功，并能够进行菌落的计数；验证选择培养基是否具有选择作用，需设立牛肉膏蛋白胨培养基作为对照，若后者上的菌落数明显大于前者，说明前者具有筛选作用。
答案 C
5．下面是对大肠杆菌进行数量测定的实验，请回答有关问题。
(1)制备稀释倍数为102、103、104、105、106的系列稀释液。
(2)为了得到更加准确的结果，选用适宜的方法接种样品：下图是利用______法进行微生物接种，把聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面，为达到这一目的，操作上应注意______________________。
(3)适宜温度下培养。
结果分析：
①一同学在稀释倍数为105的培养基中测得平板上菌落数的平均值为32.4个，那么每毫升样品中的细菌数是(接种时所用稀释液的体积为0.1 mL)______个。
②用这种方法所得的数量比实际活菌数量要______，因为
________________________________________________________________。
(4)在微生物培养操作过程中，为防止杂菌污染，操作者的双手需要进行清洗和______；已灭菌的材料用具应避免_________________________。
(5)培养大肠杆菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是______。
解析 (2)题图为平板划线法分散培养基表面的菌种，操作时应注意保持无菌，第二次及以后每次划线前接种环要灼烧，冷却后从上一区划线末端开始划，首尾区不重叠以便于分散菌种。
(3)①根据公式每克样品中菌株数＝(C÷V)×M，
知：每毫升样品中菌株数为×105＝3.24×107。
②由于当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，因此，统计结果往往少于实际菌株数。
(4)操作者双手用酒精消毒；已灭菌的材料应避免与周围物品接触，防止再次被污染。
(5)接种前检测培养基是否被污染可将未接种的培养基倒置在适宜温度下培养，观察培养基是否有菌落出现，若无则未被污染，若有则已被污染。
答案 (2)平板划线 第二次及以后每次划线前接种环要灼烧，冷却后从上一区划线末端开始划，首尾区不重叠
(3)①3.24×107 ②少 当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的是一个菌落
(4)消毒 与周围的物品接触
(5)将未接种的培养基在适宜的温度下倒置培养适宜的时间，观察培养基上是否有菌落产生
课堂小结
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